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本研究拟利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法对赤拟谷盗Tribolium castaneum (Herbst)和杂拟谷盗Tribolium confusum(Jac du Val)进行分子鉴定,以期为仓储害虫管理和口岸检疫提供技术帮助和支持.采用通用引物对赤拟谷盗和杂拟谷盗的28S rRNA基因进行了PCR扩增、序列测定和分析,结果发现:扩增片段长约1070 bp,该序列种内均无变异位点、种间有76个变异位点,即种内没有核苷酸替换发生、种间核苷酸替换发生76次,其中转换56次,颠换20次,转换/颠换的比值为2.80.用限制性内切酶PvuⅠ对赤拟谷盗和杂拟谷盗的28S rRNA基因扩增产物进行酶切,电泳检测显示,赤拟谷盗和杂拟谷盗的28S rRNA基因扩增产物的PvuⅠ酶切图谱(分别产生2个和3个酶切条带)明显不同,因此本研究建立的28SrRNA基因PCR-RFLP方法可用于赤拟谷盗与杂拟谷盗的分子鉴定.

作者:张汉松;冯照军;程超

来源:环境昆虫学报 2014 年 36卷 2期

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作者:
张汉松;冯照军;程超
来源:
环境昆虫学报 2014 年 36卷 2期
标签:
赤拟谷盗 杂拟谷盗 28S rRNA基因 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性 分子鉴定 Tribolium castaneum Tribolium confusum 28S rRNA gene PCR-RFLP molecular identification
本研究拟利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法对赤拟谷盗Tribolium castaneum (Herbst)和杂拟谷盗Tribolium confusum(Jac du Val)进行分子鉴定,以期为仓储害虫管理和口岸检疫提供技术帮助和支持.采用通用引物对赤拟谷盗和杂拟谷盗的28S rRNA基因进行了PCR扩增、序列测定和分析,结果发现:扩增片段长约1070 bp,该序列种内均无变异位点、种间有76个变异位点,即种内没有核苷酸替换发生、种间核苷酸替换发生76次,其中转换56次,颠换20次,转换/颠换的比值为2.80.用限制性内切酶PvuⅠ对赤拟谷盗和杂拟谷盗的28S rRNA基因扩增产物进行酶切,电泳检测显示,赤拟谷盗和杂拟谷盗的28S rRNA基因扩增产物的PvuⅠ酶切图谱(分别产生2个和3个酶切条带)明显不同,因此本研究建立的28SrRNA基因PCR-RFLP方法可用于赤拟谷盗与杂拟谷盗的分子鉴定.

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