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[目的]Wolbachia是广泛存在于昆虫体内的一类通过母系传递的共生菌,能够通过多种方式影响宿主的生殖.细胞质不亲和(CI)是Wolbachia引起的最普遍的一种表型,即感染Wolbachia的雄性和未感染的雌性宿主交配后,胚胎发育停滞于早期阶段.但目前有关CI的分子机理还不清楚.本研究组前期实验表明,Wolbachia感染引起黑腹果蝇Drosophila melanogaster 3龄幼虫精巢中Mst84Db基因的表达显著下调.本研究的目的是进一步研究Mst84 Db与CI的关系.[方法]我们体外合成了Mst84 Db的双链RNA(dsRNA),注射雄性果蝇,将注射过的雄果蝇与野生雌果蝇交配,检测其繁殖力.基因表达采用定量RT-PCR方法进行检测.胚胎表型采用DAPI染色进行分析.[结果]注射dsRNA 24 h后,Mst84Db基因的表达水平发生显著下调.注射后72 h,基因表达下调幅度最大.与对照组相比,基因敲降后的雄蝇繁殖能力显著下降,与雌果蝇交配后胚胎孵化率显著低于对照组,这与Wolbachia诱导的CI现象类似.未孵化胚胎的表皮上没有体节出现,说明胚胎停滞于发育的早期.部分胚胎细胞核分裂不同步,且有染色质间桥出现,这也与CI胚胎中的细胞学表型一致.[结论]Wolbachia感染可能抑制果蝇精子发生过程中Mst84Db基因的表达,从而使精子失去正常功能,最终导致与雌性果蝇交配后,胚胎发育停滞,并

作者:王翠平;郑雅;郑金晶;王玉凤

来源:昆虫学报 2014 年 57卷 3期

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作者:
王翠平;郑雅;郑金晶;王玉凤
来源:
昆虫学报 2014 年 57卷 3期
标签:
黑腹果蝇 Wolbachia 基因敲降 Mst84Db 细胞质不亲和 Drosophila melanogaster Wolbachia gene knockdown Mst84Db cytoplasmic incompatibility
[目的]Wolbachia是广泛存在于昆虫体内的一类通过母系传递的共生菌,能够通过多种方式影响宿主的生殖.细胞质不亲和(CI)是Wolbachia引起的最普遍的一种表型,即感染Wolbachia的雄性和未感染的雌性宿主交配后,胚胎发育停滞于早期阶段.但目前有关CI的分子机理还不清楚.本研究组前期实验表明,Wolbachia感染引起黑腹果蝇Drosophila melanogaster 3龄幼虫精巢中Mst84Db基因的表达显著下调.本研究的目的是进一步研究Mst84 Db与CI的关系.[方法]我们体外合成了Mst84 Db的双链RNA(dsRNA),注射雄性果蝇,将注射过的雄果蝇与野生雌果蝇交配,检测其繁殖力.基因表达采用定量RT-PCR方法进行检测.胚胎表型采用DAPI染色进行分析.[结果]注射dsRNA 24 h后,Mst84Db基因的表达水平发生显著下调.注射后72 h,基因表达下调幅度最大.与对照组相比,基因敲降后的雄蝇繁殖能力显著下降,与雌果蝇交配后胚胎孵化率显著低于对照组,这与Wolbachia诱导的CI现象类似.未孵化胚胎的表皮上没有体节出现,说明胚胎停滞于发育的早期.部分胚胎细胞核分裂不同步,且有染色质间桥出现,这也与CI胚胎中的细胞学表型一致.[结论]Wolbachia感染可能抑制果蝇精子发生过程中Mst84Db基因的表达,从而使精子失去正常功能,最终导致与雌性果蝇交配后,胚胎发育停滞,并

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