[目的]蜕皮激素在昆虫变态发育中起着关键的调控作用.蜕皮激素活化为20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone,20E)后与蜕皮激素受体二聚体[蜕皮激素受体(ecdysone receptor,EcR)和超气门蛋白(ultraspiracle protein,USP)]结合,启动20E诱导的级联反应.本研究旨在从互作蛋白角度探究EcR/USP自身调控的分子机理.[方法]以重要农业害虫斜纹夜蛾Spodoptera litura为研究对象,通过构建酵母双杂交筛选系统分别筛选了与EcR和USP相互作用的蛋白.[结果]文库转化效率达到3.0×106 cfu/μg,文库滴度达到1.3×108 cfu/mL,文库插入片段大小在500～2 000 bp之间.4种诱饵质粒(EcRA/pGBKT7,EcRB1/pGBKT7,USP1/pGBKT7和USP2/pGBKT7)对酵母细胞无毒性,并且无自激活性,说明构建的酵母双杂交文库质量可靠.用以上4种诱饵质粒筛选酵母双杂交文库,共得到110个互作蛋白,其中与EcRB1,USP1和USP2互作的蛋白分别有26,52和32个,未筛选到与EcRA互作的蛋白.随后,从中挑选了DnaJ-5(Hsp40 homolog 5,一种热激蛋白分子伴侣),MBF2(mediator of BmFTZ-F1 type 2,一种转录共激活子),polyubiquitin(多聚泛素类蛋白),esr16(ecdysteroid regulated 16kDa protein,一种蜕皮激素调控蛋白)和NEDD8-1ike(neuralprecursor cell expressed,developmentally dow

作者：范琳芳；何文婧；苏智仁；朱家明；罗威；张纯；黄立华

来源：昆虫学报 2016 年 59卷 8期