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目的 研究重组人乳铁蛋白(recombinate human lactoferrin,rhLF)对人口腔KB细胞增殖及凋亡的影响,为口腔癌患者提供新的有效治疗途径提供参考.方法 采用CCK-8法检测不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μg/mL)的rhLF分别处理KB细胞24、48、72 h后对细胞增殖的影响;Immunofluorescence及Western blotting方法检测rhLF处理前后DNA损伤相关蛋白γ-H2 AX的表达.并分别用0、50、200μg/mL的rhLF处理KB细胞,14 d后观察其对集落克隆形成的影响;0、200μg/mL rhLF处理KB细胞48 h后,收集细胞并使用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测rhLF处理前后线粒体膜电位的变化.Annexin V-PI染色检测rhLF对口腔癌KB细胞凋亡的影响;Western blotting检测0、50、200μg/mL的rhLF处理口腔癌KB细胞48 h后Parp、Caspase-3的表达情况.结果 rhLF处理KB细胞的增殖有显著的抑制作用.Immunofluorescence结果显示rhLF处理后γ-H2 AX的表达明显增加,Western blotting结果也显示rhLF处理后γ-H2 AX的表达成浓度依赖性增加.rhLF抑制KB细胞集落克隆的形成;JC-1荧光检测结果表明红绿荧光的相对比例降低,这种红绿荧光的相对比例降低提示膜电位下降;0、50、200μg/mL的rhLF处理口腔癌KB细胞48 h的凋亡率为2.02%、7.60%、48.07%;同时rhLF刺激口

作者:肖莉;张继斌;李宝霞

来源:口腔医学 2018 年 38卷 9期

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肖莉;张继斌;李宝霞
来源:
口腔医学 2018 年 38卷 9期
标签:
口腔癌 重组人乳铁蛋白 凋亡
目的 研究重组人乳铁蛋白(recombinate human lactoferrin,rhLF)对人口腔KB细胞增殖及凋亡的影响,为口腔癌患者提供新的有效治疗途径提供参考.方法 采用CCK-8法检测不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μg/mL)的rhLF分别处理KB细胞24、48、72 h后对细胞增殖的影响;Immunofluorescence及Western blotting方法检测rhLF处理前后DNA损伤相关蛋白γ-H2 AX的表达.并分别用0、50、200μg/mL的rhLF处理KB细胞,14 d后观察其对集落克隆形成的影响;0、200μg/mL rhLF处理KB细胞48 h后,收集细胞并使用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测rhLF处理前后线粒体膜电位的变化.Annexin V-PI染色检测rhLF对口腔癌KB细胞凋亡的影响;Western blotting检测0、50、200μg/mL的rhLF处理口腔癌KB细胞48 h后Parp、Caspase-3的表达情况.结果 rhLF处理KB细胞的增殖有显著的抑制作用.Immunofluorescence结果显示rhLF处理后γ-H2 AX的表达明显增加,Western blotting结果也显示rhLF处理后γ-H2 AX的表达成浓度依赖性增加.rhLF抑制KB细胞集落克隆的形成;JC-1荧光检测结果表明红绿荧光的相对比例降低,这种红绿荧光的相对比例降低提示膜电位下降;0、50、200μg/mL的rhLF处理口腔癌KB细胞48 h的凋亡率为2.02%、7.60%、48.07%;同时rhLF刺激口

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