目的：探讨整合素连接激酶(ILK)/磷酸化蛋白激酶B(Akt)信号通路在新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)修复中的作用。方法采用10日龄SD新生大鼠随机分为假手术组(n=3)和缺氧缺血组(HI组,n=23)，建立HIBD模型，于HI后0、4、6、12、24、48、72 h处死取脑，免疫荧光法检测ILK表达与分布，Western blot检测ILK、Akt、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。构建靶向ILK RNA干扰的慢病毒载体，抑制新生鼠脑组织中ILK的表达。右侧侧脑室分别注射含有LV-ILK shRNA慢病毒(n=15)和LV-control慢病毒对照(n=3)，建立HIBD模型，于HI后4 h和24 h处死动物取脑，Western blot检测ILK、Akt、p-Akt、VEGF蛋白的表达变化，TUNEL染色检测细胞凋亡。结果ILK主要表达于皮层和海马区，定位于胞浆和胞膜，在假手术组和HI组均有表达。ILK于HI后表达开始逐渐增加，24 h达高峰，之后表达有所降低。p-Akt于HI后4 h明显增加，后逐渐降低，24 h降至最低，后又增加，在48 h达高峰。VEGF于HI后4 h表达开始增加，12 h达高峰，后维持较高水平。构建的靶向ILK RNA干扰的慢病毒载体在体内应用获得成功。注射慢病毒LV-ILK shRNA组在HI 4 h、24 h时所表达的ILK、p-Akt、VEGF均明显低于同一时间点的LV-control组，同时细胞凋亡

作者：潘玲丽；屈艺；罗黎力；赵静；李姣；唐军；伍金林；李熙鸿；母得志

来源：临床儿科杂志 2014 年 8期