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目的 设计并筛选针对大鼠Smad3基因的siRNA,构建靶向Smad3基因的shRNA重组慢病毒.方法 针对大鼠Smad3基因设计并合成6对siRNA(siRNA001～006)及1对无关对照siRNA,转染大鼠肝细胞株BRL-3A,应用Western Blot检测各siRNA对SMAD3蛋白表达的抑制作用,挑选抑制效率高的siRNA.依据所得的序列合成并克隆到pLL3.7载体中,与包装质粒pRSVrev、pMDLg-pRRE和VSV-G共转染293FT细胞获得靶向Smad3的慢病毒.通过流式细胞仪绿色荧光蛋白(GFP)荧光计数来检测病毒滴度.结果 Western Blot检测证实siRNA001、siRNA005、siRNA006对SMAD3蛋白表达的抑制作用明显,抑制率分别可达83.36
作者：陈鹏；郑素军；王世美；张建军；邢欣悦；张莹；刘梅；段钟平
来源：临床肝胆病杂志 2011 年 27卷 5期
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