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目的 本研究旨在明确miR-409-3p在肝癌细胞系中的表达及其意义,并探讨可能的分子机制.方法 利用实时荧光定量PCR的方法检测miR-409-3p在正常肝细胞LO2,以及HepG2、BEL-7402、SMMC-7721、MHCC-97H四种肝癌细胞中的表达差异.阳离子脂质体法将miR-409-3p mimics及microRNA mimics control瞬时转染至肝癌细胞株HepG2 中,利用CCK8 法、平板克隆、流式细胞术检测miR-409-3p对体外癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响.Western Blot检测过表达miR-409-3p的HepG2 细胞中c-Met蛋白的表达变化,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.计量资料两组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK法.结果 基于TCGA肝癌microRNA表达谱数据,肝癌组织中miR-409-3p的表达水平显著低于癌旁组织(t=7.752,P<0.05).与在LO2 中的表达水平相比,miR-409-3p在HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、BEL-7402 中的表达水平均明显降低(F=31.043,P<0.05).与miR-con组相比,转染miR-409-3p mimics后的HepG2细胞中miR-409-3p的表达水平上升(t =-8.836,P<0.05),说明干扰有效.CCK8实验结果显示,与miR-con组相比,转染miR-409-3p mimics后的HepG2细胞增殖能力在48、72、96 h明显减弱,差异均具有统计学意义(t值分别为 2.876、3.359、

作者:王长青;陈玲;徐萍;朱晓娟;刘政

来源:临床肝胆病杂志 2023 年 39卷 8期

知识库介绍

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作者:
王长青;陈玲;徐萍;朱晓娟;刘政
来源:
临床肝胆病杂志 2023 年 39卷 8期
标签:
癌,肝细胞 微RNAs 原癌基因蛋白质c-met 细胞增殖 Carcinoma,Hepatocellular MicroRNAs Proto-Oncogene Proteins c-met Cell Proliferation
目的 本研究旨在明确miR-409-3p在肝癌细胞系中的表达及其意义,并探讨可能的分子机制.方法 利用实时荧光定量PCR的方法检测miR-409-3p在正常肝细胞LO2,以及HepG2、BEL-7402、SMMC-7721、MHCC-97H四种肝癌细胞中的表达差异.阳离子脂质体法将miR-409-3p mimics及microRNA mimics control瞬时转染至肝癌细胞株HepG2 中,利用CCK8 法、平板克隆、流式细胞术检测miR-409-3p对体外癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响.Western Blot检测过表达miR-409-3p的HepG2 细胞中c-Met蛋白的表达变化,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.计量资料两组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK法.结果 基于TCGA肝癌microRNA表达谱数据,肝癌组织中miR-409-3p的表达水平显著低于癌旁组织(t=7.752,P<0.05).与在LO2 中的表达水平相比,miR-409-3p在HepG2、SMMC-7721、MHCC-97H、BEL-7402 中的表达水平均明显降低(F=31.043,P<0.05).与miR-con组相比,转染miR-409-3p mimics后的HepG2细胞中miR-409-3p的表达水平上升(t =-8.836,P<0.05),说明干扰有效.CCK8实验结果显示,与miR-con组相比,转染miR-409-3p mimics后的HepG2细胞增殖能力在48、72、96 h明显减弱,差异均具有统计学意义(t值分别为 2.876、3.359、

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