目的 探讨多不饱和脂肪酸对人骨关节病(OA)软骨细胞自噬的影响及其促进自噬的作用机制.方法 纳入2019年5在首都医科大学附属北京友谊医院骨科接受髋关节置换的1例患者,体外分离培养人股骨头表面关节软骨细胞,使用100 pg/ml白介素-1(Interleukin-1,IL-1)建立OA软骨细胞模型.按照单纯随机抽样法,将细胞随机分为4组:对照组、白介素1(IL-1)组、IL-1+DHA组和IL-1+DHA+3-MA组.对照组加入生理盐水;IL-1组加入100 pg/ml IL-1;IL-1+DHA组加入100 pg/ml IL-1和50μg/ml DHA;IL-1+DHA+3-MA组加入100 pg/ml IL-1和50μg/ml DHA,以及5 mmol/L自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA).所有细胞培养24 h后,采用Western blotting法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、Beclin-1、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和轻链3-Ⅰ/Ⅱ(LC3-Ⅰ/Ⅱ)蛋白的表达,RT-PCR法检测相关信号通路mRNA的表达(JNK、pERK、IΚBα、PI3K、P38).结果 与对照组相比,IL-1组中的细胞自噬活性降低.与IL-1组相比,DHA减少了mTOR通路蛋白的表达,并增加了Beclin-1和LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.01),增加了细胞自噬活性.在IL-1+DHA+3-MA组,使用自噬抑制剂3-MA干预后mTOR表达增加,而Beclin-1和LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的表达减少.IL-1组的JNK、pERK、pERK和P38 mRNA表达

作者：马立峰；郭艾；王国栋；于浩淼；张良；尹合勇；曹瑞祺

来源：临床和实验医学杂志 2020 年 19卷 10期