目的 确定LncRNA PiHL在奥沙利铂耐药的结直肠癌细胞中的作用并探讨其作用机制.方法 采用CCK8法检测奥沙利铂对结直肠癌细胞的抑制率,体外构建奥沙利铂耐药的结直肠癌细胞系,qRT-PCR检测结直肠癌细胞中PiHL的表达水平;利用分子克隆技术构建稳定过表达PiHL的正常结直肠癌细胞系和稳定干扰PiHL的奥沙利铂耐药结直肠癌细胞系,CCK8法和流式细胞术检测PiHL表达水平的改变对奥沙利铂作用下细胞的存活率和凋亡比例的影响;TCGA数据库分析和qRT-PCR预测PiHL与多梳抑制复合物2(PRC2)途径基因之间存在的相关性;RNA pull-down和western blot确定PiHL与Zeste增强子同源物2(EZH2)之间的作用关系;RNA-seq与qRT-PCR结合确定PRC2表观遗传作用靶点.结果 耐药细胞系中PiHL的表达水平较正常细胞显著升高.稳定过表达PiHL细胞后对奥沙利铂的敏感性降低.同时,在耐药结直肠癌细胞系中,干扰PiHL表达组药物作用下细胞存活率明显低于对照组,细胞对奥沙利铂敏感性增加.TCGA数据库分析发现PiHL表达和PRC2的组成成分EZH2、SUZ12、EED的表达水平存在显著正相关,qRT-PCR确认结直肠癌组织样本中PiHL的表达与EZH2呈正相关;在HCT116细胞中,RNA pull-down和western blot结果显示,体外转录的LncRNA PiHL可以与细胞中EZH2蛋白直接结合;过表达或
作者：李思；田思雨；袁宏
来源：临床检验杂志 2021 年 39卷 9期
