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目的 探究阻滞腺苷A2A受体(A2AR)对胶质瘤细胞干性特征与保护性自噬的影响.方法 将人胶质瘤U87细胞分为四组:对照组、shNC组、shA2AR组、SCH58261组,分别将shNC、shA2AR转染至shNC组与shA2AR组细胞中,SCH58261组使用A2AR拮抗剂SCH58261处理细胞,收集处理后的4组U87细胞,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中A2AR mRNA表达水平,蛋白质免疫印记(Western Blot)检测细胞中A2AR蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞周期分布,细胞肿瘤球形成实验检测细胞干性,LC3自噬双标腺病毒实验检测自噬溶酶体与自噬体形成,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中干细胞标记物巢蛋白(Nestin)、SRY相关高迁移率族盒蛋白2(SOX2)、八聚体结合转录因子4(OCT4)以及自噬相关分子微管相关蛋白3(LC3)II/LC3I、Beclin1的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,shA2AR组和SCH58261组U87细胞中A2AR mRNA相对表达量与蛋白相对表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);G1期细胞比例增加,差异具有统计学意义(P<0.05);S期细胞比例减少,差异具有统计学意义(P<0.05);肿瘤球形成数目减少,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞中红色斑点代表的自噬溶酶体与黄色斑点代表的自噬体均明显增多,细胞凋亡率增加,差异具有统计学意义(P<0.

作者:邓国棋;盛强;邵云香;杨岩;张勖;徐敬轩

来源:临床神经外科杂志 2024 年 21卷 1期

知识库介绍

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作者:
邓国棋;盛强;邵云香;杨岩;张勖;徐敬轩
来源:
临床神经外科杂志 2024 年 21卷 1期
标签:
胶质瘤 腺苷A2A受体 干性特征 保护性自噬 glioma adenosine A2A receptor stemness characteristics protective autophagy
目的 探究阻滞腺苷A2A受体(A2AR)对胶质瘤细胞干性特征与保护性自噬的影响.方法 将人胶质瘤U87细胞分为四组:对照组、shNC组、shA2AR组、SCH58261组,分别将shNC、shA2AR转染至shNC组与shA2AR组细胞中,SCH58261组使用A2AR拮抗剂SCH58261处理细胞,收集处理后的4组U87细胞,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中A2AR mRNA表达水平,蛋白质免疫印记(Western Blot)检测细胞中A2AR蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞周期分布,细胞肿瘤球形成实验检测细胞干性,LC3自噬双标腺病毒实验检测自噬溶酶体与自噬体形成,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中干细胞标记物巢蛋白(Nestin)、SRY相关高迁移率族盒蛋白2(SOX2)、八聚体结合转录因子4(OCT4)以及自噬相关分子微管相关蛋白3(LC3)II/LC3I、Beclin1的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,shA2AR组和SCH58261组U87细胞中A2AR mRNA相对表达量与蛋白相对表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05);G1期细胞比例增加,差异具有统计学意义(P<0.05);S期细胞比例减少,差异具有统计学意义(P<0.05);肿瘤球形成数目减少,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞中红色斑点代表的自噬溶酶体与黄色斑点代表的自噬体均明显增多,细胞凋亡率增加,差异具有统计学意义(P<0.

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