目的：探讨依维莫司（ EVE）对人宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡及上皮间质转化（ EMT）的影响。方法常规培养SiHa细胞达对数生长期后，采用终浓度为1、10、100μmol／L EVE处理SiHa细胞，采用四甲基偶氮唑盐比色法测定对照组及不同浓度EVE处理24、48、72和96 h后的细胞增殖情况，分别采用Annexin V?FITC／PI双染联合流式细胞术和实时荧光定量聚合酶链反应（ qRT?PCR）检测不同浓度EVE处理96 h的早期和晚期凋亡率及凋亡相关基因（ Bax、Bad和Bcl?2）的表达情况，Western blotting和免疫荧光法检测各组处理96 h后的EMT相关标记分子包括上皮型钙粘附素（ E?cad）、纤维连接蛋白（ FN）和波形蛋白（ Vim）的水平。结果 EVE在1～100μmol／L范围内对SiHa细胞有增殖抑制作用，且增殖抑制率呈剂量和时间依赖性，除1μmol／L作用24 h外，其余浓度及作用时间的增殖抑制率均高于对照组（ P＜0?05）；与对照组相比，EVE处理96 h后的早期、晚期凋亡率及Bax、Bad的mRNA水平均升高，而Bcl?2 mRNA水平降低，差异均有统计学意义（ P＜0?05），且呈剂量依赖性；EVE处理后的E?cad水平均高于对照组，而FN和Vim水平均低于对照组（ P＜0?05）。结论采用EVE阻断mTOR通路对宫颈癌SiHa细胞有毒性作用，不仅抑制其增殖且诱导凋亡，可能
作者：吴秋芳；唐周舟；张定富
来源：临床肿瘤学杂志 2015 年 8期
