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目的 探讨下调miR-9表达在口腔鳞癌Tca83细胞对顺铂(DDP)耐药性的影响以及可能的作用机制.方法 体外培养口腔鳞癌亲本细胞株Tca83及耐药细胞株Tca83DDPR.实时荧光定量PCR(QPCR)法检测Tca83细胞和Tca83DDPR细胞miR-9和Beclin1 mRNA的表达.分别沉默Tca83细胞中miR-9和Beclin1的表达,设置Tca83细胞空白对照(CTL)组、miR-9 inhibitor组、si-NC1组、miR-9 inhibitor+si-Beclin1组、si-NC2组.MTT法检测不同浓度DDP对上述各组细胞增殖活性的抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI).采用GFP荧光法观察自噬泡形成.Western blotting检测Beclin1和微管相关蛋白1轻链3-β(LC3-Ⅱ)蛋白的表达.双荧光素酶报告实验分析miR-9与Beclin1的靶向关系.结果 与Tca83细胞比较,Tca83DDPR细胞miR-9表达量(0.79±0.08)降低,而Beclin1表达量(1.27±0.14)升高,差异有统计学意义(P<0.05).miR-9 inhibitor组和miR-9 inhibitor+si-Beclin1组Tca83细胞中miR-9的表达量分别为0.39±0.05和0.37±0.04,明显低于CTL组、si-NC1组、si-NC2组(P<0.05).miR-9 inhibitor+si-Beclin1组Tca83细胞中Beclin1表达量为0.45±0.06,低于CTL组、si-NC1组、miR-9 inhibitor组、si-NC2组(P<0.05).MTT法检测,DDP对Tca83细胞和Tca83DDPR细胞IC50分别为

作者:李璐;王拓;邵华英;江帆

来源:临床肿瘤学杂志 2021 年 26卷 2期

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作者:
李璐;王拓;邵华英;江帆
来源:
临床肿瘤学杂志 2021 年 26卷 2期
标签:
口腔鳞癌 miR-9 Beclin1 自噬 顺铂耐药性
目的 探讨下调miR-9表达在口腔鳞癌Tca83细胞对顺铂(DDP)耐药性的影响以及可能的作用机制.方法 体外培养口腔鳞癌亲本细胞株Tca83及耐药细胞株Tca83DDPR.实时荧光定量PCR(QPCR)法检测Tca83细胞和Tca83DDPR细胞miR-9和Beclin1 mRNA的表达.分别沉默Tca83细胞中miR-9和Beclin1的表达,设置Tca83细胞空白对照(CTL)组、miR-9 inhibitor组、si-NC1组、miR-9 inhibitor+si-Beclin1组、si-NC2组.MTT法检测不同浓度DDP对上述各组细胞增殖活性的抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI).采用GFP荧光法观察自噬泡形成.Western blotting检测Beclin1和微管相关蛋白1轻链3-β(LC3-Ⅱ)蛋白的表达.双荧光素酶报告实验分析miR-9与Beclin1的靶向关系.结果 与Tca83细胞比较,Tca83DDPR细胞miR-9表达量(0.79±0.08)降低,而Beclin1表达量(1.27±0.14)升高,差异有统计学意义(P<0.05).miR-9 inhibitor组和miR-9 inhibitor+si-Beclin1组Tca83细胞中miR-9的表达量分别为0.39±0.05和0.37±0.04,明显低于CTL组、si-NC1组、si-NC2组(P<0.05).miR-9 inhibitor+si-Beclin1组Tca83细胞中Beclin1表达量为0.45±0.06,低于CTL组、si-NC1组、miR-9 inhibitor组、si-NC2组(P<0.05).MTT法检测,DDP对Tca83细胞和Tca83DDPR细胞IC50分别为

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