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目的 探讨circ_0000285对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞氧化损伤的影响及其可能作用机制.方法 H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞氧化损伤模型,si-NC、si-circ_0000285、si-circ_0000285与anti-miR-NC、si-circ_0000285与anti-miR-625分别转染至H9C2细胞后加入200μmol/L H2O2处理;用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测circ_0000285、miR-625的表达量;用试剂盒检测丙二醛(malondialedhyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度与超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)的活性;用MTT实验检测细胞增殖能力;用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测circ_0000285与miR-625的靶向关系;Western blot法检测活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3,cleaved caspase-3)、微管相关蛋白轻链3II(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅱ,LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅰ,LC3-Ⅰ)蛋白表达量并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.结果 H2O2诱导的H9C2细胞中circ_0000285的表达量升高(1.00±0.04 vs.2.24±0.12),而miR-625的表达量降低(1.00±0.05 vs.0.37±0.05);转

作者:杨少君;周乃珍;王晓霞

来源:岭南心血管病杂志 2022 年 28卷 6期

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作者:
杨少君;周乃珍;王晓霞
来源:
岭南心血管病杂志 2022 年 28卷 6期
标签:
circ_0000285 微小RNA-625 大鼠心肌细胞H9C2 过氧化氢 心肌细胞损伤
目的 探讨circ_0000285对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞氧化损伤的影响及其可能作用机制.方法 H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞氧化损伤模型,si-NC、si-circ_0000285、si-circ_0000285与anti-miR-NC、si-circ_0000285与anti-miR-625分别转染至H9C2细胞后加入200μmol/L H2O2处理;用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测circ_0000285、miR-625的表达量;用试剂盒检测丙二醛(malondialedhyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度与超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)的活性;用MTT实验检测细胞增殖能力;用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测circ_0000285与miR-625的靶向关系;Western blot法检测活化半胱氨酸蛋白酶3(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3,cleaved caspase-3)、微管相关蛋白轻链3II(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅱ,LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(microtubule-associated protein l light chain 3Ⅰ,LC3-Ⅰ)蛋白表达量并计算LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.结果 H2O2诱导的H9C2细胞中circ_0000285的表达量升高(1.00±0.04 vs.2.24±0.12),而miR-625的表达量降低(1.00±0.05 vs.0.37±0.05);转

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