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目的 构建人CD154基因真核细胞表达载体。方法 采用RT-PCR方法,从激活的人外周血淋巴细胞的总cDNA中扩增得到820 bp的人CD154 cDNA片段,再用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,限制性内切酶酶切分析重组质粒和DNA序列分析。结果 人CD154 cDNA已经正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中。结论 本研究为探讨CD154分子与淋巴细胞活化的关系及其信号传导机制,为进一步用于抗移植排斥反应的研究,或对由于CD154遗传缺陷所致的免疫缺陷病的基因治疗奠定了基础。

作者:张春艳;宁波;李树浓;张志方;冯炼强

来源:免疫学杂志 2001 年 17卷 2期

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作者:
张春艳;宁波;李树浓;张志方;冯炼强
来源:
免疫学杂志 2001 年 17卷 2期
标签:
人CD154 RT-PCR 基因克隆 序列分析
目的 构建人CD154基因真核细胞表达载体。方法 采用RT-PCR方法,从激活的人外周血淋巴细胞的总cDNA中扩增得到820 bp的人CD154 cDNA片段,再用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,限制性内切酶酶切分析重组质粒和DNA序列分析。结果 人CD154 cDNA已经正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中。结论 本研究为探讨CD154分子与淋巴细胞活化的关系及其信号传导机制,为进一步用于抗移植排斥反应的研究,或对由于CD154遗传缺陷所致的免疫缺陷病的基因治疗奠定了基础。

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