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目的将超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcus enterotoxin A,SEA)基因与人胎盘碱性磷酸酶(hPLAP-1)C末端信号肽序列,即糖基化磷脂酰肌醇(glycosyl-phosphatidyl inositol,GPI)附着信号序列,拼接成融合基因,并构建该融合基因的真核表达载体.方法利用基因SOEing法,分别扩增hPLAP-1 C末端信号肽序列和SEA基因,然后将二段基因拼接起来,拼接后与pGEM-T克隆载体连接,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,测序鉴定.结果分别成功扩增出hPLAP-1 C末端信号肽序列131 bp和SEA基因789 bp,并将二段基因序列成功拼接(901 bp),且成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)/SEA-GPI,经测序是正确的.结论真核表达载体pcDNA3.1(+)/SEA -GPI的构建,为研究SEA -GPI抗肿瘤作用奠定了基础.
作者：易平勇；余海；马文学
来源：免疫学杂志 2002 年 18卷 5期
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