目的 研究微小RNA-152(miR-152)通过其靶基因人类白细胞抗原G(HLA-G)与蜕膜NK细胞(dNK)表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)KIR2DL4之间通路,对dNK分泌白血病抑制因子(LIF)及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的影响.方法 收集2020年9月-2020年10月在西安市人民医院行人工流产患者的正常早孕蜕膜组织5例,分选、纯化dNK.在体外培养的HTR8细胞中过表达和抑制miR-152,分为对照组(未转染)、过表达组(转染miR-152 mimics)与抑制组(转染miR-152 inhibitor).实时定量PCR(qRT-PCR)检测转染后miR-152水平.构建dNK与过表达或抑制miR-152后的HTR8共培养体系,并在共培养过程中特异性封闭dNK KIR2DL4,分组为:NC组[HTR-8+dNK+白细胞介素-15(IL-15)共培养]、A组(过表达miR-152 的 HTR-8+dNK+IL-15)、B组(抑制 miR-152 的 HTR-8+dNK+IL-15)、C 组[过表达 miR-152 的 HTR-8+dNK+KIR2DL4 抑制物(anti-KIR2DL4)+IL-15]、D 组[过表达 miR-152 的 HTR-8+dNK+IgG1(anti-KIR2DL4对照物)+IL-15]、E组(转染 miR-152 mimics NC 的 HTR-8+dNK+anti-KIR2DL4+IL-15).酶联免疫吸附测定(ELISA)检测共培养24 h后上清中LIF、GM-CSF的表达.结果 转染后6h于荧光显微镜下观察转染效率(羧基荧光素酶标记对照),可见转染效率超过90%.与对照组(
作者:杨洋;陈宥艺;宋姗姗;张欣文
来源:热带医学杂志 2022 年 22卷 5期