目的 探讨华支睾吸虫分泌排泄蛋白(CsESP)诱导宿主细胞自噬参与致病的机制.方法 建立华支睾吸虫感染的小鼠模型,分为感染组和对照组,感染组每鼠经口灌胃囊蚴50个,对照组每鼠灌入等体积生理盐水.体外培养人肝星状细胞LX-2,采用不同浓度CsESP(0、1、5、10、20、30、50 μg/mL)刺激LX-2细胞,Western blot检测感染组和对照组中小鼠肝组织及活化的LX2细胞中自噬相关分子微管相关蛋白1轻链3(LC3B)和自噬相关蛋白16L1(ATG16L1)的蛋白水平.采用CsESP与自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)、氯喹(CQ)或自噬诱导剂Earle's平衡盐溶液(EBSS)、雷帕霉素(Rapamycin)共同刺激LX-2细胞,分为Control(正常细胞)组、二甲基亚砜(DMSO)组、CsESP(50 μg/mL)+3-MA(10 mmol/L,预处理 2 h)组、3-MA(10 mmol/L)组、CsESP(50 μg/mL)+CQ(30 μmol/L,预处理8 h)组、CQ(30 μmol/L)组、CsESP(50 μg/mL)+EBSS(预处理3 h)组、EBSS组、CsESP(50 μg/mL)+Rapamycin(200 nmol/L,预处理8 h)组和Rapamycin(200 nmol/L)组共十组.Western blot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷蛋白70核糖体蛋白S6激酶(P70S6K)、p-P70S6K以及Jun氨基末端激酶(p-JNK1/2)和磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38(p-P38)的表达情况.结果 与对照组相比,20、50 μg/mL的CsES
作者:陈文君;罗辉;尚梅
来源:热带医学杂志 2023 年 23卷 2期