目的 构建Ipr1/PPE68重组卡介苗(Recombinant BCG,rBCG),探讨其诱导BALB/C小鼠免疫应答的效果.方法 将Ipr1和PPE68基因及结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)复制子OriM分别插入pBudCE4.1的多克隆位点,构建共表达穿梭质粒pBIPO,将其电转入BCG,构建Iprl/PPE68-rBCG并将rBCG免疫BALB/C小鼠,检测小鼠血清中IgG2a、IL-12、IFN-γ及IL-4的水平、特异性脾淋巴细胞增殖和CD4+和CD8+T细胞数量,同时观察脾、肺荷菌量及脾、肺组织病理学变化.结果 酶切测序及菌落PCR鉴定Iprl和PPE68以及OriM基因序列与理论值相符,Western-blotting结果显示Ipr1和PPE68蛋白成功表达.Ipr1/PPE68-rBCG免疫小鼠后,血清中的IgG2a和IL-12水平及脾淋巴细胞增殖情况明显高于对照组,但与BCG组相比没有显著意义；IFN-γ水平显著低于BCG组,与对照组相比无显著性差异；各组别IL-4的水平差异均不明显.脾、肺荷菌实验未见菌落生长,肺、脾组织未见病理学改变.结论 成功构建Ipr1/PPE68-rBCG;该重组BCG能诱导BALB/C小鼠的细胞免疫应答.
作者：张壮苗；杨春；徐蕾；何永林；王静娴；董志玲；杨静
来源：四川动物 2013 年 32卷 4期
