目的 探讨miR-449在高糖(HG)作用下对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成骨分化的影响及其可能的作用机制.方法 将hBMSCs接种于成骨培养基培养,诱导其成骨分化.实验组:成骨培养基中加入高糖25 mmol/L,模拟高糖微环境处理.对照组:细胞维持在5 mmol/L葡萄糖的正常培养基中.采用茜素红染色、碱性磷酸酶活性测定、双荧光素酶测定、实时定量PCR(qRT-PCR)检测等方法测定以下指标:①miR-449在HG诱导的hBMSCs成骨分化时的表达水平;②miR-449模拟物和抑制物对碱性磷酸酶(ALP)活性,成骨相关标志物表达的影响;③Sirt1和Fra-1的过表达对miR-449在HG处理的hBMSCs成骨分化标志物表达的影响.结果 ①HG处理的实验组hBMSCs成骨分化低于对照组细胞(P＜0.05),miR-449表达水平较对照组降低(P＜0.05).②在HG诱导的hBMSCs成骨分化过程中,miR-449模拟物可降低ALP活性(P＜0.05),降低成骨标志物的mRNA表达(P＜0.05);而miR-449抑制剂能提高成骨标志物的mRNA活性(P＜0.05).③miR-449直接靶向结合Sirt1,Sirt1过表达逆转了 miR-449模拟物对Fra-1mRNA表达的抑制作用,而Fra-1的过表达减轻了这种抑制作用;过表达Fra-1可减轻miR-449模拟物对ALP活性及成骨标志物mRNA的抑制作用.结论 miR-449过表达通过Sirt1/Fra-1信号通路抑制HG处理的hBMSCs的成

作者：彭凤；刘浩；杨红胜；屈波

来源：四川医学 2023 年 44卷 5期