目的:探讨银屑病与细胞炎症反应、凋亡有关的机制及相关分子信号通路,分析白芍总苷(TGP)发挥治疗作用的机制.方法:收集并分析临床银屑病患者全基因转录组表达测序结果,分析与银屑病发病相关的主要信号通路与分子靶点.使用不同浓度的白细胞介素-17(IL-17)刺激HaCaT细胞,构建银屑病细胞模型,在不同时间点采用细胞计数试剂盒8(CCK8)检测细胞活性的变化,并确定IL-17的最佳作用浓度及作用时间.使用不同浓度的TGP处理后,检测角质形成细胞活性的变化.使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测IL-17诱导HaCaT细胞中炎症相关分子的表达,并与TGP处理后的IL-17诱导HaCaT细胞炎症-凋亡相关分子表达结果进行对比.使用生物信息学数据库预测与细胞炎症-凋亡因子相关的转录因子.敲除转录因子相关基因后,检测IL-17处理的HaCaT细胞中炎症-凋亡因子表达,验证相关转录因子的表达调控作用.使用蛋白质印迹法(WB)和免疫荧光技术检测IL-17诱导的HaCaT细胞中炎症-凋亡相关分子的表达,并与TGP处理后IL-17诱导的HaCaT细胞进行对比,分析TGP的治疗机制.实验中采用随机分组并同步处理细胞,分为IL-17组、对照组及TGP+IL-17组,并使用Graph Pad-Prism 6软件,采用t检验对结果进行分析.结果:全基因转录组表达测序结果显示,IL-17相关信号通路评分最高
作者:张莉;布乃滨;孙淑娜;董秀慧;焦晶;张晓杰;庞雪
来源:山东中医药大学学报 2023 年 47卷 4期