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目的:构建抗HPV16E7的噬菌体抗体库.方法:由感染者抗凝血中分离外周淋巴细胞,提取细胞总RNA,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),用人IgG Fab基因特异引物,从合成的cDNA中分别扩增出抗体轻链和重链可变区基因,回收纯化PCR产物.用SpeI+XhoI酶切重链可变区基因,XbaI+SacI酶切轻链可变区基因,先后克隆入噬菌体载体pComb3.结果:PCR产物经电泳证实分子量大小正确,酶切电泳证实质粒构建正确.结论:成功构建抗体轻链和重链基因克隆,建立抗HPV16E7噬菌体抗体库.
作者:刘颖;于修平;赵蔚明;卞继峰;杨海宁;贾继辉;董杰德;周亚滨;栾怡;齐眉
来源:山东医科大学学报 2002 年 40卷 1期
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