目的：探讨一种改良的玻璃化液冻存乳鼠卵巢，复苏后进行异体原位移植，评价其对卵母细胞成熟、受精及胚胎发育潜能的影响。方法乳鼠卵巢进行ED20和改良的EG5．5/30液玻璃化冻存，复苏后的乳鼠卵巢一部分酶解消化，通过荧光活力检测卵子的存活率；激光共聚焦显微镜观察α-tubulin的免疫荧光检测卵子内细胞骨架的变化。一部分乳鼠卵巢进行成年去势雌鼠的原位移植。标本随机分为新鲜组和新鲜移植组；ED20液冷冻组和ED20液冻融移植组；EG5．5/30液冷冻组和EG5．5/30冻融移植组。术后15 d，受体鼠同雄鼠合笼，统计移植6个月内的产仔情况；术后6个月，检测恢复动情周期的受体鼠雌二醇（E2）水平。结果玻璃化冻融乳鼠卵巢后， ED20液冷冻组和EG5．5/30液冷冻组卵子存活率（87．0％，84．6％）低于新鲜组（92．6％）（P＜0．05）；冻融后卵子内微丝和微管结构受损，荧光强度均低于新鲜组（P＜0．05）；接受冻融卵巢原位移植的受体鼠可以实现自然产仔，但两冷冻液冻融移植组首窝产仔时间、平均每窝产仔数、产仔总数均较新鲜移植组差异有统计学意义（P＜0．05）。结论改良的EG5．5/30液冻存幼鼠卵巢复苏后异体原位移植同ED20液效果相似，受体鼠可诞生正常子代，但是生殖储备和生育力明显下降。
作者：王红燕；王燕蓉；徐仙；赵君利；哈灵侠；贾韶彤；刘春莲
来源：山东大学学报（医学版） 2014 年 11期
