目的：探讨液氮冻存心脏瓣膜的合适冻存保护剂及降温方式。方法将健康捐赠者的心脏瓣膜剪切为7份：新鲜对照组1份，冻存液 A、B、C 3个组每组2份，分别为－80℃直接降温组（G1组）和程控降温仪缓慢降温组（G2组）。采用苏木精－伊红染色、弹力纤维染色、Masson 染色法观察显微结构变化，透射电子显微镜（TEM）观察超微结构变化，采用 Western blotting 法及免疫组织化学法检测瓣膜表面人类白细胞抗原复合体（HLA）的相对表达量，比较各组瓣膜组织免疫原性。结果低温冻存会造成瓣膜组织结构损伤，使用含 DMSO 和硫酸软骨素的冻存液 B 组结构最完整，组织损伤最小，HLA-I 蛋白的表达明显下调；G2组与 G1组相比，胶原纤维着色偏浅，纤维排列更加紊乱，但 HLA-I 蛋白的表达相对较低。结论同时含有 DMSO 和硫酸软骨素对冻存组织保护效果最好，免疫原性最低。－80℃直接降温更有利于胶原纤维的保存，但免疫原性高于程控降温法。
作者：宫妍婕；王龙；董来东；李栋；宋光民；鞠秀丽
来源：山东大学学报（医学版） 2016 年 54卷 8期
