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目的:探讨胸苷激酶( TK)基因在库欣病的基因治疗中的作用及机制。方法采用免疫印迹法检测腺病毒载体AdPOMCTK转入小鼠垂体瘤AtT20细胞及人乳腺癌T47D细胞后TK基因的表达情况;采用非放射性细胞增殖检测试剂盒检测AdPOMCTK在不同感染复数( MOI)下转染AtT20细胞和人T47D细胞后对更昔洛韦( GCV)的敏感性。将转染了AdPOMCTK的AtT20细胞和未经转染的细胞以不同比例混合,观察旁观者效应。结果 TK基因转染入AtT20细胞并成功表达,但在T47D细胞中表达不明显,说明POMC启动子具有靶向性;即使在低MOI下,转染组细胞仍明显表现出对GCV的敏感性;混合细胞与对照细胞相比杀伤作用明显,说明旁观者效应存在。结论将TK基因导入AtT20细胞并经GCV处理后可明显降低细胞存活率。本研究为临床TK基因治疗库欣病奠定了实验基础。

作者:宋庆鑫;王建鹏;阴晓峰;相恒伟;刘霞;张欣;孙鹏

来源:山东医药 2014 年 10期

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作者:
宋庆鑫;王建鹏;阴晓峰;相恒伟;刘霞;张欣;孙鹏
来源:
山东医药 2014 年 10期
标签:
库欣病 基因疗法 更昔洛韦 胸苷激酶
目的:探讨胸苷激酶( TK)基因在库欣病的基因治疗中的作用及机制。方法采用免疫印迹法检测腺病毒载体AdPOMCTK转入小鼠垂体瘤AtT20细胞及人乳腺癌T47D细胞后TK基因的表达情况;采用非放射性细胞增殖检测试剂盒检测AdPOMCTK在不同感染复数( MOI)下转染AtT20细胞和人T47D细胞后对更昔洛韦( GCV)的敏感性。将转染了AdPOMCTK的AtT20细胞和未经转染的细胞以不同比例混合,观察旁观者效应。结果 TK基因转染入AtT20细胞并成功表达,但在T47D细胞中表达不明显,说明POMC启动子具有靶向性;即使在低MOI下,转染组细胞仍明显表现出对GCV的敏感性;混合细胞与对照细胞相比杀伤作用明显,说明旁观者效应存在。结论将TK基因导入AtT20细胞并经GCV处理后可明显降低细胞存活率。本研究为临床TK基因治疗库欣病奠定了实验基础。

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