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目的:探讨RNA干扰( RNAi)介导胰岛素样生长因子1受体( IGF-1R)基因沉默对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞PC-9/ZD发生上皮-间质转化(EMT)的影响。方法构建靶向IGF-1R基因的RNAi重组慢病毒,感染NSCLC表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂( EGFR-TKIs)获得性耐药细胞PC-9/ZD;实时荧光定量PCR法检测IGF-1R表达抑制效应及IGF-1R基因沉默后EMT相关分子的mRNA表达变化,Transwell实验检测细胞侵袭转移能力变化。结果成功构建靶向IGF-1R基因的RNAi重组慢病毒,滴度为1×106 TU/μL,对PC-9/ZD细胞IGF-1R基因的mRNA抑制效率为71.4%。 IGF-1R基因沉默后,PC-9/ZD细胞形态呈现间质向上皮化转变,上皮标志物E-cadherin的mRNA表达量升高(P<0.05),间质标志物Vimentin的mRNA表达量降低(P<0.05),且侵袭转移能力减弱(P<0.05)。结论靶向IGF-1R基因沉默可逆转PC-9/ZD细胞EMT。

作者:张曦;张为民;陈蓓

来源:山东医药 2014 年 23期

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作者:
张曦;张为民;陈蓓
来源:
山东医药 2014 年 23期
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RNA干扰 基因沉默 胰岛素样生长因子1型受体 上皮-间质转化 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂 获得性耐药 RNA interference gene silencing insulin-like growth factor 1 receptor epithelial-mesenchymal transi-tion non-small-lung cancer epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors acquired drug resistance
目的:探讨RNA干扰( RNAi)介导胰岛素样生长因子1受体( IGF-1R)基因沉默对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞PC-9/ZD发生上皮-间质转化(EMT)的影响。方法构建靶向IGF-1R基因的RNAi重组慢病毒,感染NSCLC表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂( EGFR-TKIs)获得性耐药细胞PC-9/ZD;实时荧光定量PCR法检测IGF-1R表达抑制效应及IGF-1R基因沉默后EMT相关分子的mRNA表达变化,Transwell实验检测细胞侵袭转移能力变化。结果成功构建靶向IGF-1R基因的RNAi重组慢病毒,滴度为1×106 TU/μL,对PC-9/ZD细胞IGF-1R基因的mRNA抑制效率为71.4%。 IGF-1R基因沉默后,PC-9/ZD细胞形态呈现间质向上皮化转变,上皮标志物E-cadherin的mRNA表达量升高(P<0.05),间质标志物Vimentin的mRNA表达量降低(P<0.05),且侵袭转移能力减弱(P<0.05)。结论靶向IGF-1R基因沉默可逆转PC-9/ZD细胞EMT。

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