目的 观察S100A6基因转染、抑制对宫颈癌细胞增殖迁移能力的影响,并探讨其机制.方法 将宫颈癌Hela细胞分为观察1组、对照1组和空白1组.观察1组转染pcDNA3.0-S100A6真核表达载体,对照1组转染pcDNA3.0空载体质粒,空白1组不转染.将宫颈癌CaSki细胞分为观察2组、对照2组及空白2组.观察2组转染S100A6 siRNA,对照2组转染无关序列,空白2组不转染.转染24 h后收集各组细胞.①采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞S100A6 mRNA相对表达量;②采用细胞迁移实验观察各组细胞迁移能力(以穿膜细胞数表示);③采用Western blotting法检测各组细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin)和PI3K-Akt信号通路相关蛋白(p-AKT、t-AKT、Snail、Twist)表达量;④继续培养24、48、72 h,采用CCK-8法观察各组细胞增殖能力(以OD450表示).结果 ①转染24 h观察1组、对照1组、空白1组Hela细胞S100A6 mRNA相对表达量分别为3.87 ±0.86、1.04 ±0.08、0.97 ±0.11,观察1组Hela细胞S100A6 mRNA相对表达量与对照1组和空白1组相比,P均<0.05;观察2组、对照2组、空白2组CaSki细胞S100A6 mRNA相对表达量分别为0.43 ±0.07、1.12 ± 0.09、0.98 ±0.12,观察2组CaSki细胞S100A6 mRNA相对表达量与对照2组和空白2组相比,P均<0.05.②转染24
作者:姚月荣;刘富群
来源:山东医药 2018 年 58卷 3期