目的 探讨新型共刺激分子B7-H4表达抑制对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 从人肝癌细胞系Hep3B,SMMC-7721,Huh-7,PLC/PRF/5,HepG2,HCCLM3中筛选高表达B7-H4的细胞.培养高表达B7-H4的人肝癌细胞,将所培养的细胞随机分为三组:对照组、shRNA-1组、shRNA-2组.shRNA-1组、shRNA-2组分别转染对应的B7-H4慢病毒抑制基因序列,对照组加转染试剂但不予干扰序列.采用Western blotting法检测B7-H4表达量,挑选出shRNA-2组HCCLM3肝癌细胞进行下一步实验.分别于转染1、2、3、4、5 d,CCK-8法检测肝癌细胞增殖情况;转染后72h,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡率.结果 6个细胞株中,HCCLM3的B7-H4相对表达量最高,为高表达B7-H4细胞株.shRNA-1组、shRNA-2组B7-H4被抑制,且shRNA-2组抑制更明显.与对照组同时间比较,除转染1 d细胞增殖活性差异无统计学意义外,shRNA-2组HCCLM3细胞增殖活性降低(P均<0.05);细胞凋亡率升高(P均<0.05).结论 抑制B7-H4表达可明显抑制人肝癌细胞的增殖活性,并促使其凋亡.
作者:何涛;胡洪;谢楠;钱程;李春满;唐波;付必莽;李文
来源:山东医药 2018 年 58卷 29期