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目的 观察脂多糖(LPS)诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞炎症反应后miR-21的变化,并通过转染miR-21模拟物(miR-21 mimics)探讨miR-21的作用.方法 培养人肾皮质近曲小管上皮HK-2细胞,采用LPS诱导其炎症反应;另培养HK-2细胞,转染miR-21 mimics或NC mimics,再用LPS诱导其炎症反应.收集细胞,采用RT-qPCR法检测miR-21、IL-6 mRNA表达,Western blotting法检测IL-6蛋白表达.结果 (1)与对照细胞比较,LPS诱导的HK-2细胞各时间点IL-6 mRNA和蛋白表达均升高,miR-21表达均降低(P均<0.05).(2)与转染NC mimics的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h的HK-2细胞miR-21表达升高(P<0.05);与转染NC mimics并经LPS诱导的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h并经LPS诱导8 h的HK-2细胞IL-6 mRNA表达下降(P<0.05).(3)与转染NC mimics并经LPS诱导的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h并经LPS诱导12 h细胞miR-21的表达上升(P<0.05);与转染阴性对照物并经LPS诱导24 h的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h并经LPS诱导24 h的HK-2细胞IL-6蛋白表达下降(P<0.05).结论 LPS可诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞出现炎症反应,使IL-6表达上升、miR-21表达下降;转染miR-21 mimics可减轻LPS诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞炎症反应.

作者:王平军;曾其毅

来源:山东医药 2018 年 58卷 48期

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作者:
王平军;曾其毅
来源:
山东医药 2018 年 58卷 48期
标签:
脓毒症 急性肾损伤 微小RNA-21 脂多糖 炎症反应 sepsis acute kidney injury miRNA-21 lipopolysaccharide inflammatory response
目的 观察脂多糖(LPS)诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞炎症反应后miR-21的变化,并通过转染miR-21模拟物(miR-21 mimics)探讨miR-21的作用.方法 培养人肾皮质近曲小管上皮HK-2细胞,采用LPS诱导其炎症反应;另培养HK-2细胞,转染miR-21 mimics或NC mimics,再用LPS诱导其炎症反应.收集细胞,采用RT-qPCR法检测miR-21、IL-6 mRNA表达,Western blotting法检测IL-6蛋白表达.结果 (1)与对照细胞比较,LPS诱导的HK-2细胞各时间点IL-6 mRNA和蛋白表达均升高,miR-21表达均降低(P均<0.05).(2)与转染NC mimics的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h的HK-2细胞miR-21表达升高(P<0.05);与转染NC mimics并经LPS诱导的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h并经LPS诱导8 h的HK-2细胞IL-6 mRNA表达下降(P<0.05).(3)与转染NC mimics并经LPS诱导的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h并经LPS诱导12 h细胞miR-21的表达上升(P<0.05);与转染阴性对照物并经LPS诱导24 h的HK-2细胞比较,转染miR-21 mimics 24 h并经LPS诱导24 h的HK-2细胞IL-6蛋白表达下降(P<0.05).结论 LPS可诱导人肾皮质近曲小管上皮细胞出现炎症反应,使IL-6表达上升、miR-21表达下降;转染miR-21 mimics可减轻LPS诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞炎症反应.

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