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目的 观察缺氧环境下用siRNA特异性沉默胃癌细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α) 后, 胃癌细胞葡萄糖载体蛋白1(GLUT-1) 、M2型丙酮酸激酶(PKM2) 表达的变化.方法 将胃癌细胞BGC-823分为正常组、缺氧对照组、转染HIF-1αsiRNA组和转染对照组.用氯化钴(Co Cl2) 体外模拟肿瘤细胞缺氧环境, 缺氧对照组加入200μmol/L Co Cl2缺氧培养12 h;转染HIF-1αsiRNA组、转染对照组分别转染HIF-1αsiRNA、Control siRNA, 48 h后加入200μmol/L Co Cl2缺氧培养12 h.采用qRT-PCR法和Western blotting法检测4组细胞内HIF-1α、GLUT-1、PKM2mRNA及蛋白表达.结果 与正常组比较, 缺氧对照组HIF-1αmRNA表达无明显变化(P> 0.05) , HIF-1α蛋白表达升高, GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达均升高(P <0.05或<0.01);与缺氧对照组比较, 转染HIF-1αsiRNA组HIF-1α、GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达均降低(P <0.05或<0.01) , 转染对照组HIF-1α、GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达无明显变化(P均> 0.05);与转染对照组比较, 转染HIF-1αsiRNA组HIF-1α、GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达均降低(P <0.05或<0.01) .结论 缺氧可促进人胃癌BGC-823细胞HIF-1α、GLUT-1、PKM2表达, 沉默HIF-1α表达后BGC-823细胞HIF-1α、GLUT-1、PKM2表达下调;HIF-1α可能参与

作者:舍玲;丁永年;彭媛媛;白洁;梁灿灿

来源:山东医药 2019 年 59卷 5期

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作者:
舍玲;丁永年;彭媛媛;白洁;梁灿灿
来源:
山东医药 2019 年 59卷 5期
标签:
胃癌 缺氧诱导因子1α 葡萄糖载体蛋白1 M2型丙酮酸激酶 gastric carcinoma hypoxia-inducible factor-1α glucose transporter-1 pyruvate kinase M2
目的 观察缺氧环境下用siRNA特异性沉默胃癌细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α) 后, 胃癌细胞葡萄糖载体蛋白1(GLUT-1) 、M2型丙酮酸激酶(PKM2) 表达的变化.方法 将胃癌细胞BGC-823分为正常组、缺氧对照组、转染HIF-1αsiRNA组和转染对照组.用氯化钴(Co Cl2) 体外模拟肿瘤细胞缺氧环境, 缺氧对照组加入200μmol/L Co Cl2缺氧培养12 h;转染HIF-1αsiRNA组、转染对照组分别转染HIF-1αsiRNA、Control siRNA, 48 h后加入200μmol/L Co Cl2缺氧培养12 h.采用qRT-PCR法和Western blotting法检测4组细胞内HIF-1α、GLUT-1、PKM2mRNA及蛋白表达.结果 与正常组比较, 缺氧对照组HIF-1αmRNA表达无明显变化(P> 0.05) , HIF-1α蛋白表达升高, GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达均升高(P <0.05或<0.01);与缺氧对照组比较, 转染HIF-1αsiRNA组HIF-1α、GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达均降低(P <0.05或<0.01) , 转染对照组HIF-1α、GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达无明显变化(P均> 0.05);与转染对照组比较, 转染HIF-1αsiRNA组HIF-1α、GLUT-1、PKM2 mRNA及蛋白表达均降低(P <0.05或<0.01) .结论 缺氧可促进人胃癌BGC-823细胞HIF-1α、GLUT-1、PKM2表达, 沉默HIF-1α表达后BGC-823细胞HIF-1α、GLUT-1、PKM2表达下调;HIF-1α可能参与

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