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目的 探讨槲皮素后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤细胞凋亡的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的关系.方法 将体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、H/R组、H/R+槲皮素组(H/R+Que组)、H/R+槲皮素+抑制剂组(H/R+Que+W组)共4组.Con组细胞正常培养6 h;H/R组仅构建H/R模型;H/R+Que组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入终浓度为40μmol/L的槲皮素,随即复氧4 h;H/R+Que+W组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入PI3K抑制剂Wortamannin 100 nmol/L和槲皮素40μmol/L,复氧4 h.采用MTT法测定细胞活力;比色法测定培养液LDH活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2基因家族中的促凋亡基因(Bax)蛋白表达.结果 与Con组比较,H/R组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05).与H/R组比较,H/R+Que组细胞存活率升高,LDH活性和细胞凋亡率降低,p-Akt表达上调,Bcl-2/Bax增高(P均<0.05).与H/R+Que组比较,H/R+Que+W组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05).结论 槲皮素后处理通过激活PI3K/Akt信号途径减轻H/R引起的心肌细胞凋亡.

作者:王赟;张宗泽;张婧婧;陈莹莹;吴云;王焱林

来源:山东医药 2019 年 59卷 23期

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作者:
王赟;张宗泽;张婧婧;陈莹莹;吴云;王焱林
来源:
山东医药 2019 年 59卷 23期
标签:
槲皮素 缺氧 复氧 心肌细胞 PI3K/Akt信号通路 细胞凋亡
目的 探讨槲皮素后处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤细胞凋亡的影响及其与磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的关系.方法 将体外培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Con组)、H/R组、H/R+槲皮素组(H/R+Que组)、H/R+槲皮素+抑制剂组(H/R+Que+W组)共4组.Con组细胞正常培养6 h;H/R组仅构建H/R模型;H/R+Que组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入终浓度为40μmol/L的槲皮素,随即复氧4 h;H/R+Que+W组于缺氧结束时,在DMEM培养基中加入PI3K抑制剂Wortamannin 100 nmol/L和槲皮素40μmol/L,复氧4 h.采用MTT法测定细胞活力;比色法测定培养液LDH活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2基因家族中的促凋亡基因(Bax)蛋白表达.结果 与Con组比较,H/R组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05).与H/R组比较,H/R+Que组细胞存活率升高,LDH活性和细胞凋亡率降低,p-Akt表达上调,Bcl-2/Bax增高(P均<0.05).与H/R+Que组比较,H/R+Que+W组细胞存活率降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt表达下调,Bcl-2/Bax降低(P均<0.05).结论 槲皮素后处理通过激活PI3K/Akt信号途径减轻H/R引起的心肌细胞凋亡.

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