目的:构建变形链球菌葡糖基转移酶葡聚糖结合区段(GBR)基因的表达载体,探讨重组GBR蛋白的免疫原性.方法:通过PCR、T-A克隆等技术,构建GBR基因表达载体pTriEx-4-GBR,对所构建的表达载体进行DNA序列测定和酶切图谱分析;IPTG诱导pTriEx-4-GBR中目的基因在大肠杆菌JM109(DE3)表达,纯化、浓缩重组GBR蛋白;Balb/c小鼠随机分为2组:实验组用重组GBR蛋白经皮下注射免疫,对照组用生理盐水代替重组GBR蛋白;ELISA法检测小鼠血清抗GBR特异性抗体:用统计软件PEMS3.0对数据进行处理.结果:载有GBR目的基因的表达质粒pTriEx-4-GBR序列及读码框架正确;诱导表达获得的重组GBR蛋白浓度和纯度均较高;用该重组蛋白对小鼠作皮下接种免疫后,诱导产生血清抗GBR特异IgG显著应答(P＜0.005).结论:表达载体pTriEx-4-GBR构建成功,所获得的重组GBR蛋白能诱导小鼠特异免疫应答,为进行进一步相关实验研究奠定了基础.
作者：王小华；姜广水；吴钦贞；姜萍萍；耿昭；张冰
来源：上海口腔医学 2006 年 15卷 3期
