目的 从调控外泌体分泌角度,探讨黄芪甲苷(ASⅣ)抑制结直肠癌转移的作用及机制.方法 ①细胞实验:使用低、中、高剂量ASⅣ干预MC38细胞,收集细胞上清提取外泌体;透射电镜(TEM)观察外泌体形态;纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体密度;免疫荧光法和实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测ASⅣ对外泌体生成、分泌相关基因中性鞘磷脂酶-2(nSMase2)、Ras相关蛋白27a(Rab27a)表达的影响;划痕和Transwell实验检测ASⅣ对肿瘤细胞迁移能力的影响.②动物实验:构建小鼠结直肠癌肝转移模型,随机分为模型组、ASⅣ组和鞘磷脂酶抑制剂(GW4869)组,28 d后处死小鼠,观察小鼠肝转移情况.苏木素-伊红(HE)染色法观察肝组织病理学变化,免疫荧光法检测肝转移灶内nSMase2、Rab27a的表达.结果 ①细胞实验结果显示:与对照组比较,ASⅣ干预不改变外泌体形态,但能够通过浓度和时间依赖方式抑制MC38细胞外泌体分泌(P<0.05);与对照组比较,ASⅣ能够减少MC38细胞中nSMase2、Rab27a的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),且呈浓度依赖性;与对照组比较,ASⅣ能够抑制MC38细胞侵袭迁移能力(P<0.05),且呈浓度依赖性.②动物实验结果显示:与模型组比较,ASⅣ能够显著降低小鼠结直肠癌肝转移模型肝组织质量(P<0.05),减少肝转移瘤数量(P<0.05),降低nSMase
作者：浦匀舟；李昊泽；李玲；周晶；季青
来源：上海中医药杂志 2023 年 57卷 6期
