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本文通过PCR技术,直接从大熊猫基因组DNA上克隆得到其神经营养素-4的成熟肽编码序列,通过序列分析发现,该基因在进化上具有较高的保守性.将神经营养素-4成熟肽完整编码序列克隆至pGEX-4T-3表达载体,并经IPTG诱导在大肠杆菌中进行原核生物表达,获得了大熊猫重组蛋白神经营养素-4.重组表达蛋白经纯化后,进行大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞神经营养因子的活性鉴定,发现其能够诱导神经细胞分化产生突触,具有预期的生物学活性.对大熊猫神经营养素-4的基因工程研究,为大熊猫癫痫的基因治疗奠定了基础.

作者:饶刚;方盛国;Tsutomu Fujihara;魏辅文

来源:兽类学报 2004 年 24卷 1期

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作者:
饶刚;方盛国;Tsutomu Fujihara;魏辅文
来源:
兽类学报 2004 年 24卷 1期
标签:
癫痫 神经营养素-4 基因表达 纯化 大熊猫 Epilepsy Neurotrophin-4 Gene expression Purification Giant panda (Ailuropoda melanoleuca)
本文通过PCR技术,直接从大熊猫基因组DNA上克隆得到其神经营养素-4的成熟肽编码序列,通过序列分析发现,该基因在进化上具有较高的保守性.将神经营养素-4成熟肽完整编码序列克隆至pGEX-4T-3表达载体,并经IPTG诱导在大肠杆菌中进行原核生物表达,获得了大熊猫重组蛋白神经营养素-4.重组表达蛋白经纯化后,进行大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞神经营养因子的活性鉴定,发现其能够诱导神经细胞分化产生突触,具有预期的生物学活性.对大熊猫神经营养素-4的基因工程研究,为大熊猫癫痫的基因治疗奠定了基础.

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