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[目的]探究石房蛤毒素(STX)完全抗原制备方法和STX多克隆抗体免疫方案.[方法]通过碳二亚胺法(EDC)和高碘酸盐法(periodate reaction) 2种交联方法,将小分子石房蛤毒素与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)和孔血蓝蛋白(KLH)分别进行交联,制备了6种形式STX完全抗原,并对交联物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定和紫外吸收峰迁移变化鉴定.分别将EDC法和高碘酸盐法交联的STX-BSA、STX-KLH 4种完全抗原作为免疫原,对 Balb/c 小鼠进行免疫,获得 STX 多克隆抗体.通过间接ELISA法,对不同方法制备的多克隆抗体进行分析比较.[结果]在石房蛤毒素完全抗原的制备中,在交联方法的选择上,EDC法较高碘酸盐法更具优势;而在免疫原的选择上,STX-BSA完全抗原效果最好.[结论]本研究探究了2种制备STX完全抗原的方法,为今后多克隆抗体生产以及特异性单克隆抗体筛选提供数据支撑.

作者:陈睿;高烨宏;赵学楠;杨敏仪;吴惠娟;王荣智;汪世华

来源:生物安全学报 2022 年 31卷 2期

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作者:
陈睿;高烨宏;赵学楠;杨敏仪;吴惠娟;王荣智;汪世华
来源:
生物安全学报 2022 年 31卷 2期
标签:
贝类毒素 STX毒素 蛋白交联 完全抗原 ELISA
[目的]探究石房蛤毒素(STX)完全抗原制备方法和STX多克隆抗体免疫方案.[方法]通过碳二亚胺法(EDC)和高碘酸盐法(periodate reaction) 2种交联方法,将小分子石房蛤毒素与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)和孔血蓝蛋白(KLH)分别进行交联,制备了6种形式STX完全抗原,并对交联物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定和紫外吸收峰迁移变化鉴定.分别将EDC法和高碘酸盐法交联的STX-BSA、STX-KLH 4种完全抗原作为免疫原,对 Balb/c 小鼠进行免疫,获得 STX 多克隆抗体.通过间接ELISA法,对不同方法制备的多克隆抗体进行分析比较.[结果]在石房蛤毒素完全抗原的制备中,在交联方法的选择上,EDC法较高碘酸盐法更具优势;而在免疫原的选择上,STX-BSA完全抗原效果最好.[结论]本研究探究了2种制备STX完全抗原的方法,为今后多克隆抗体生产以及特异性单克隆抗体筛选提供数据支撑.

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