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目的:研究人牙周膜干细胞(hPDLSCs)在转染miR-26a后成骨分化的促进效果.方法:从因正畸拔除的无龋坏、无牙周疾病离体牙的牙根中部牙周膜组织中分离、胶原酶消化,进行人牙周膜干细胞的体外培养.使用脂质体2000进行miRNA转染,采用激光共聚焦观察转染效果;MTT方法检测转染后的细胞活力;成骨诱导后使用实时定量PCR技术检测miRNA修饰的hPDLSCs成骨分化相关基因的表达;采用BCIP/NBT、天狼星红、茜素红S分别对碱性磷酸酶、胶原以及钙化进行染色观察.结果:采用脂质体2000能够成功转染hPDLSCs,且转染效率较高;转染后的细胞活力有所下降,但仍在80%以上;转染后的细胞在经成骨诱导分化过程中骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)基因表达显著上调,同时碱性磷酸酶活性、胶原分泌以及钙化能力均得到显著提升.结论:miR-26a可以用于修饰hPDLSCs以提高其成骨分化能力.

作者:米修奎;李彦;余善超;胡文军

来源:现代生物医学进展 2016 年 16卷 3期

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作者:
米修奎;李彦;余善超;胡文军
来源:
现代生物医学进展 2016 年 16卷 3期
标签:
人牙周膜干细胞 成骨分化 miR-26a 细胞培养 Human periodontal ligament stem cells Osteogenic differentiation miR-26a Cell culture
目的:研究人牙周膜干细胞(hPDLSCs)在转染miR-26a后成骨分化的促进效果.方法:从因正畸拔除的无龋坏、无牙周疾病离体牙的牙根中部牙周膜组织中分离、胶原酶消化,进行人牙周膜干细胞的体外培养.使用脂质体2000进行miRNA转染,采用激光共聚焦观察转染效果;MTT方法检测转染后的细胞活力;成骨诱导后使用实时定量PCR技术检测miRNA修饰的hPDLSCs成骨分化相关基因的表达;采用BCIP/NBT、天狼星红、茜素红S分别对碱性磷酸酶、胶原以及钙化进行染色观察.结果:采用脂质体2000能够成功转染hPDLSCs,且转染效率较高;转染后的细胞活力有所下降,但仍在80%以上;转染后的细胞在经成骨诱导分化过程中骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)基因表达显著上调,同时碱性磷酸酶活性、胶原分泌以及钙化能力均得到显著提升.结论:miR-26a可以用于修饰hPDLSCs以提高其成骨分化能力.

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