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目的:观察低氧处理不同时间对人肺腺癌A549细胞增殖的影响,探讨合理的人肺腺癌细胞株A549体外模拟缺氧时间.方法:将人肺腺癌细胞A549细胞株在低氧环境下分别培养12h、24 h、48 h、72 h,设置常氧对照组,通过CCK8法测定A549细胞存活率,RT-PCR和免疫印迹分别检测细胞缺氧诱导因子-1α (hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA及蛋白的表达.结果:低氧24h组A549细胞存活率最高,低氧48 h、72h组A549细胞存活率呈时间依赖性明显下降(P<0.001).自低氧12h起,A549细胞HIF-1α mRNA和VEGFmRNA的表达开始随低氧时间延长而显著增加(P均<0.001);HIF-1α和VEGF蛋白表达自24 h开始随低氧时间延长而显著增加(P均<0.001).结论:低氧诱导的A549细胞存活率呈时间依赖性降低,而HIF-1α、VEGF表达呈时间依赖性增高,人肺癌细胞株A549缺氧模型最适时间为24 h.

作者:张璐;沈红;沈立;朱祎娜;崔进

来源:现代生物医学进展 2019 年 19卷 1期

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作者:
张璐;沈红;沈立;朱祎娜;崔进
来源:
现代生物医学进展 2019 年 19卷 1期
标签:
低氧 活性 缺氧诱导因子-1 α 血管内皮生长因子 模型
目的:观察低氧处理不同时间对人肺腺癌A549细胞增殖的影响,探讨合理的人肺腺癌细胞株A549体外模拟缺氧时间.方法:将人肺腺癌细胞A549细胞株在低氧环境下分别培养12h、24 h、48 h、72 h,设置常氧对照组,通过CCK8法测定A549细胞存活率,RT-PCR和免疫印迹分别检测细胞缺氧诱导因子-1α (hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA及蛋白的表达.结果:低氧24h组A549细胞存活率最高,低氧48 h、72h组A549细胞存活率呈时间依赖性明显下降(P<0.001).自低氧12h起,A549细胞HIF-1α mRNA和VEGFmRNA的表达开始随低氧时间延长而显著增加(P均<0.001);HIF-1α和VEGF蛋白表达自24 h开始随低氧时间延长而显著增加(P均<0.001).结论:低氧诱导的A549细胞存活率呈时间依赖性降低,而HIF-1α、VEGF表达呈时间依赖性增高,人肺癌细胞株A549缺氧模型最适时间为24 h.

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