目的:克隆西藏小型猪CYP3A基因并与人及其它小型猪品种进行序列比对分析.方法:根据Genebank数据库设计引物,取西藏小型猪新鲜肝脏组织,Trizol法提取肝脏总RNA,应用RT-PCR反转获得肝脏cDNA.分别扩增基因CYP3A46、CYP3A22、CYP3A29及CYP3A39,PCR片段回收后分别连接pMD-18T载体,获得重组质粒pT-CYP3A,阳性重组克隆送测序.采用NCBIBlast及vector NTI软件进行序列比对分析.结果:CYP3A46、CYP3A22、CYP3A29及CYP3A39基因编码序列全长1512 bp,编码503个氨基酸,与人CYP3A4相同.其中CYP3A22和CYP3A39与NCBI记录巴马小型猪序列相同;CYP3A46与巴马小型猪CYP3A46(NM_001134824.1)有6个位点碱基不同.CYP3A29与巴马小型猪CYP3A46(EU918131.1)亦有6个位点碱基不同.对来自2个母本后代猪的基因经过PCR扩增后测序发现CYP3A46、CYP3A29序列完全一致.结论:成功克隆西藏小型猪CYP3A的4个基因,其中CYP3A46与人CYP3A4的序列相似性最高.所得CYP3A46与CYP3A29序列可能为西藏小型猪独有.
作者：卢康荣；白静；张嘉宁；顾为望；黄黎珍；王万山
来源：现代生物医学进展 2019 年 19卷 7期
