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角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor 2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景.为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2 cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株.IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达.镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95

作者:余德荣;游力;王郡甫;许晓群;赵跃然;高春义

来源:中国生物工程杂志 2007 年 27卷 2期

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作者:
余德荣;游力;王郡甫;许晓群;赵跃然;高春义
来源:
中国生物工程杂志 2007 年 27卷 2期
标签:
重组hKGF2 克隆 原核表达 镍亲和层析
角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor 2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景.为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2 cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株.IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达.镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95

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