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Rv2628蛋白是结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis (M.tb) DosR调控的潜伏感染相关抗原.本研究对Rv2628蛋白进行了原核表达和纯化,并以巨噬细胞系和小鼠为研究模型,对其免疫生物学特性进行了分析.SDS-PAGE及Western blotting鉴定结果表明,Rv2628-His融合蛋白以包涵体形式表达,能与兔抗H37Rv多抗血清发生特异性反应,具有较好的免疫反应性.与巨噬细胞系RAW264.7的互作实验结果表明,在1-12 h内Rv2628蛋白能诱导前炎性因子IL-6的上调表达.将纯化的Rv2628融合蛋白皮下免疫BALB/c小鼠,夹心ELISA的测定结果表明,Rv2628蛋白免疫组诱导产生的特异性IFN-γ水平显著高于IL-4的水平(P< 0.000 1),呈现Th1型细胞免疫应答趋势;以Rv262811-30多肽作为包被抗原,通过间接ELISA测定的血清抗体效价能达到1∶1 600,表明Rv2628也能诱导体液免疫应答.总之,Rv2628能促进巨噬细胞炎症反应的发生,激发小鼠产生强烈的Th1型细胞免疫应答和较好的体液免疫应答,具有作为亚单位疫苗的潜力,为M.tb与宿主之间的相互作用奠定了一定的理论基础.

作者:殷月兰;高云飞;赵丹;连凯;陈祥;徐正中;潘志明;焦新安

来源:生物工程学报 2014 年 30卷 2期

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作者:
殷月兰;高云飞;赵丹;连凯;陈祥;徐正中;潘志明;焦新安
来源:
生物工程学报 2014 年 30卷 2期
标签:
结核分枝杆菌 Rv2628 Th1型应答 前炎性因子 巨噬细胞系 Mycobacterium tuberculosis Rv2628 Th1 type immunity pro-inflammatory cytokines macrophage cell line
Rv2628蛋白是结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis (M.tb) DosR调控的潜伏感染相关抗原.本研究对Rv2628蛋白进行了原核表达和纯化,并以巨噬细胞系和小鼠为研究模型,对其免疫生物学特性进行了分析.SDS-PAGE及Western blotting鉴定结果表明,Rv2628-His融合蛋白以包涵体形式表达,能与兔抗H37Rv多抗血清发生特异性反应,具有较好的免疫反应性.与巨噬细胞系RAW264.7的互作实验结果表明,在1-12 h内Rv2628蛋白能诱导前炎性因子IL-6的上调表达.将纯化的Rv2628融合蛋白皮下免疫BALB/c小鼠,夹心ELISA的测定结果表明,Rv2628蛋白免疫组诱导产生的特异性IFN-γ水平显著高于IL-4的水平(P< 0.000 1),呈现Th1型细胞免疫应答趋势;以Rv262811-30多肽作为包被抗原,通过间接ELISA测定的血清抗体效价能达到1∶1 600,表明Rv2628也能诱导体液免疫应答.总之,Rv2628能促进巨噬细胞炎症反应的发生,激发小鼠产生强烈的Th1型细胞免疫应答和较好的体液免疫应答,具有作为亚单位疫苗的潜力,为M.tb与宿主之间的相互作用奠定了一定的理论基础.

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