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构建人IL-34真核表达载体并将其转染到人骨髓间充质干细胞,观察高表达IL-34的骨髓间充质干细胞对THP-1细胞的影响.PCR扩增IL-34 DNA,并将其克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP;将构建成功的重组体转染到骨髓间充质干细胞,Western blotting和ELISA分析IL-34在细胞中的表达;用高表达IL-34的骨髓间充质干细胞培养上清液来培养THP-1细胞,Real-time PCR分析THP-1细胞中IL-10和TNFα的表达变化.经双酶切和测序鉴定,成功构建了pIRES2-EGFP-IL-34重组体;转染至骨髓间充质干细胞的IL-34可以促进THP-1细胞表达IL-10和TNFα.结果表明,骨髓间充质干细胞表达分泌的IL-34对THP-1有调节作用.

作者:高雪明;张顺;许兆军;单艳;王子鸿;蔡挺;江雪

来源:生物工程学报 2017 年 33卷 4期

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作者:
高雪明;张顺;许兆军;单艳;王子鸿;蔡挺;江雪
来源:
生物工程学报 2017 年 33卷 4期
标签:
人骨髓间充质干细胞 白细胞介素-34 THP-1细胞 白细胞介素-10 肿瘤坏死因子-α human bone marrow derived mesen chymal stem cells IL-34 THP-1 cells IL-10 TNFα
构建人IL-34真核表达载体并将其转染到人骨髓间充质干细胞,观察高表达IL-34的骨髓间充质干细胞对THP-1细胞的影响.PCR扩增IL-34 DNA,并将其克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP;将构建成功的重组体转染到骨髓间充质干细胞,Western blotting和ELISA分析IL-34在细胞中的表达;用高表达IL-34的骨髓间充质干细胞培养上清液来培养THP-1细胞,Real-time PCR分析THP-1细胞中IL-10和TNFα的表达变化.经双酶切和测序鉴定,成功构建了pIRES2-EGFP-IL-34重组体;转染至骨髓间充质干细胞的IL-34可以促进THP-1细胞表达IL-10和TNFα.结果表明,骨髓间充质干细胞表达分泌的IL-34对THP-1有调节作用.

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