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目的:Aspergillus niger(CU-1)菌株α-葡萄糖苷酶基因(aNA)克隆并对其序列进行分析,构建该基因的真核表达载体.方法:设计合成的一对特异性引物,采用PCR以总DNA为模板,扩增得到DNA片段(01);采用RT-PCR方法扩增得到DNA片段(D2).将DNA片段D1和D2转入大肠杆菌中并进行了序列测定,序列进行BLAST比对分析.将α-葡萄糖苷酶基因的cDNA片段与表达载体pGAeZαA连接,构建重组表达载体.结果:基因agdA大小为3 127bp,含有3个外显子和4个内含子.该基因的cDNA序列大小为2 958bp,包含完整的编码框,编码985个氨基酸.agdA基因序列与已发表的α-葡萄糖苷基因序列同源性达99
作者：王继瑞；张云开；覃晓娟；李玮；梁智群
来源：生物技术 2009 年 19卷 5期
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