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目的:筛选鉴定产胆固醇氧化酶的菌株并对其酶的性质及发酵条件进行初步的研究.方法:利用唯一碳源的胆固醇平板筛选,酶活测定比较得酶活力最高的菌株;生理生化试验结合16S rDNA 序列分析鉴定其种属,单因素及正交实验优化培养基及发酵条件.结果:所得菌株 H4 与产不动杆菌(Acinetobacter)有最近的亲缘关系,其胆固醇氧化酶作用的最适温度和 pH 分别为37℃和8.0,金属离子Mg2+、Zn2+、Fe2+对该酶具有一定激活作用,菌株产酶的最适培养基为(g/L):胆固醇1.5,蔗糖5,蛋白胨7,硝酸铵3,吐温1.0,pH7.5;最适培养条件为33℃,15mL培养基/100mL三角瓶,摇床培养(200r/min)48 h,优化后发酵液酶活达 135.8 U/L.结论:获得了1株产胆固醇氧化酶的菌株 H4,并初步鉴定为不动杆菌(Acinetobacter).
作者：刘雪；范运梁；杜中亮；戴美学
来源：生物技术 2010 年 20卷 3期
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