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为了利用原核表达系统研制有生物活性的鸭IFN-α。以pMD18T-MaIFN-α为模板扩增绿头鸭IFN-α成熟肽基因，将其克隆至原核表达载体pET-32a中，在大肠杆菌BL21中进行变温诱导表达。SDS-PAGE分析表达结果，并用Western blotting进行验证。Ni2+树脂柱纯化目的蛋白后，测定其生物活性。结果表明，重组pET-32a（+）-MaIFN-α在大肠杆菌BL21成功表达，主要以可溶性形式存在，Western blotting分析显示目的蛋白具有良好的抗原性。细胞病变抑制法测定重组鸭IFN-α的抗病毒活性约为8×104 U/mL；荧光定量PCR方法检测显示表达的重组鸭IFN-α使NDV在DEF上的复制受到了明显的抑制，48 h时间点相对抑制率高达91
作者：刘澜澜；庄艳娜；于晓红；曾祥伟
来源：生物技术通报 2014 年 11期
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