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绿脓杆菌外膜蛋白OprF可有效激活机体的免疫机制对抗细菌的感染,在疫苗上有很好的应用前景。采用分子克隆方法获得绿脓杆菌外膜蛋白OprF表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得OprF蛋白,免疫小鼠制备OprF蛋白多克隆抗体。ELISA法表明,OprF抗血清滴度达1∶12800倍,Western blotting证实抗血清具有很好的特异性。通过DNAMAN软件对OprF序列同源性分析发现其C端在不同细菌间存在较高同源性;采用MEGA软件对OprF的系统发生分析发现假单胞菌属细菌的亲缘关系高于其它属细菌。

作者:陈春琳;刘祥;俱雄

来源:生物技术通报 2015 年 8期

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陈春琳;刘祥;俱雄
来源:
生物技术通报 2015 年 8期
标签:
OprF蛋白 多克隆抗体 酶联试验 Western blotting 系统发生分析 OprF protein polyclonal antibody ELASA Western blotting phylogenetic analysis
绿脓杆菌外膜蛋白OprF可有效激活机体的免疫机制对抗细菌的感染,在疫苗上有很好的应用前景。采用分子克隆方法获得绿脓杆菌外膜蛋白OprF表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得OprF蛋白,免疫小鼠制备OprF蛋白多克隆抗体。ELISA法表明,OprF抗血清滴度达1∶12800倍,Western blotting证实抗血清具有很好的特异性。通过DNAMAN软件对OprF序列同源性分析发现其C端在不同细菌间存在较高同源性;采用MEGA软件对OprF的系统发生分析发现假单胞菌属细菌的亲缘关系高于其它属细菌。

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