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旨在探寻保存方式及制作干标本前回软温度对蜜蜂不同部位 DNA 的影响。采用酚-氯仿法对不同方式保存的蜜蜂以及不同温度回软后的蜜蜂干标本的总 DNA 进行提取,通过琼脂糖凝胶电泳和 PCR 扩增对 DNA 的提取结果进行鉴定。电泳结果显示,从新鲜标本、无水乙醇泡制或自然干燥保存半年的标本中均可提取到较高质量的总 DNA,尤以头部与足部提取效果最佳。经不同水浴温度回软后保存半年的蜜蜂干标本总 DNA 提取结果显示,回软温度为65℃时对蜜蜂 DNA 的破坏性最小,DNA 提取的最佳部位为蜜蜂足部。正交试验结果显示,55℃回软后的足部为蜜蜂干标本 DNA 提取的最优组合。PCR 扩增结果显示,本实验提取的总 DNA 能成功地应用于蜜蜂线粒体基因16S rRNA 和 CO I 的扩增。从保存方式、提取部位和回软操作3个因素对蜜蜂标本DNA 的提取进行了研究,提供了较好的选择方案。

作者:张红利;贾鑫磊;刘建霞;张永芳

来源:生物技术通报 2016 年 32卷 7期

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作者:
张红利;贾鑫磊;刘建霞;张永芳
来源:
生物技术通报 2016 年 32卷 7期
标签:
蜜蜂 干标本 回软 DNA 提取 bee dried specimens softening DNA extraction
旨在探寻保存方式及制作干标本前回软温度对蜜蜂不同部位 DNA 的影响。采用酚-氯仿法对不同方式保存的蜜蜂以及不同温度回软后的蜜蜂干标本的总 DNA 进行提取,通过琼脂糖凝胶电泳和 PCR 扩增对 DNA 的提取结果进行鉴定。电泳结果显示,从新鲜标本、无水乙醇泡制或自然干燥保存半年的标本中均可提取到较高质量的总 DNA,尤以头部与足部提取效果最佳。经不同水浴温度回软后保存半年的蜜蜂干标本总 DNA 提取结果显示,回软温度为65℃时对蜜蜂 DNA 的破坏性最小,DNA 提取的最佳部位为蜜蜂足部。正交试验结果显示,55℃回软后的足部为蜜蜂干标本 DNA 提取的最优组合。PCR 扩增结果显示,本实验提取的总 DNA 能成功地应用于蜜蜂线粒体基因16S rRNA 和 CO I 的扩增。从保存方式、提取部位和回软操作3个因素对蜜蜂标本DNA 的提取进行了研究,提供了较好的选择方案。

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