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探讨利用腺病毒载体作为汉滩病毒基因工程疫苗载体的可行性.通过PCR扩增,得到完整的汉滩病毒76-118株M片段编码区,将该片段克隆入质粒pAdTrackCMV的CMV启动子下游,得到阳性克隆pAdTrackCMV-M.PmeⅠ线性化的阳性克隆与腺病毒骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,经同源重组后得到重组病毒pAdEasy-M.pAdEasy-M经PacⅠ线性化后,脂质体介导转染293细胞,经Western-blot检测表明,G1、G2基因在293细胞中得到表达.重组病毒免疫BALB/c小鼠,产生了具有一定中和活性的抗体.该研究为进一步研制以腺病毒为活载体的工程疫苗奠定了基础.

作者:罗保君;张强;董京芳;丁美;刘树玲;杭长寿;李银太;周育森

来源:生物技术通讯 2004 年 15卷 1期

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作者:
罗保君;张强;董京芳;丁美;刘树玲;杭长寿;李银太;周育森
来源:
生物技术通讯 2004 年 15卷 1期
标签:
汉滩病毒M片段 重组腺病毒 表达
探讨利用腺病毒载体作为汉滩病毒基因工程疫苗载体的可行性.通过PCR扩增,得到完整的汉滩病毒76-118株M片段编码区,将该片段克隆入质粒pAdTrackCMV的CMV启动子下游,得到阳性克隆pAdTrackCMV-M.PmeⅠ线性化的阳性克隆与腺病毒骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,经同源重组后得到重组病毒pAdEasy-M.pAdEasy-M经PacⅠ线性化后,脂质体介导转染293细胞,经Western-blot检测表明,G1、G2基因在293细胞中得到表达.重组病毒免疫BALB/c小鼠,产生了具有一定中和活性的抗体.该研究为进一步研制以腺病毒为活载体的工程疫苗奠定了基础.

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