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目的：鉴定高致病性H5N1禽流感病毒感染A549肺癌细胞后，细胞蛋白质组的表达变化，并鉴定特异分子通路的改变及其涉及的关键蛋白质分子。方法：利用稳定同位素标记氨基酸技术（SILAC）标记A549细胞，得到“重标”或“轻标”的A549细胞；“重标”细胞感染高致病性H5N1禽流感病毒24 h后提取细胞总蛋白，与从未感染病毒的“轻标”细胞中提取的总蛋白等量混合，酶解肽段，经正交反相色谱分离后用质谱鉴定，对数据进行定性和定量分析。结果：共鉴定到3504个蛋白质，有定量信息的蛋白质为2469个，病毒感染后表达量升高的蛋白质为72个，表达量降低的蛋白质为66个，其中包括参与多个分子调控途径如RNA剪接体、干扰素诱导通路、泛素化通路、胰岛素通路等的蛋白质。结论：建立了利用SILAC技术研究宿主细胞-病毒相互作用的方法，发现了高致病性H5N1禽流感病毒感染宿主细胞相关的关键蛋白质，为探索H5N1病毒致病的分子机理提供了理论基础。
作者：王继峰；李靖；康晓平；吴晓燕；钱小红；应万涛；杨银辉
来源：生物技术通讯 2013 年 6期
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