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目的:建立2种结核分枝杆菌(Mtb)抗体的双抗原夹心ELISA检测方法,并初步评价其在Mtb血清学临床辅助诊断中的应用价值.方法:采用Mtb融合抗原38kD+ESAT6+CFP10作为包被抗原,分别以辣根过氧化物酶(HRP)和生物素(Bio)标记的38kD+ESAT6+CFP10作为标记抗原,建立2种Mtb双抗原夹心ELISA法,即HRP-ELISA法和Bio-ELISA法;采用所建立的2种方法对结核患者和健康对照血清进行检测.结果:经过一系列的反应条件优化,确定HRP-ELISA法和Bio-ELISA法的最佳抗原包被浓度分别为2、0.25 μg/mL,最适加样量均为100μL血清原液,最佳标记抗原稀释率分别为1:500、1:2000,检测的灵敏度分别为43.66％、52.11％,特异性均为100％.结论:建立了2种Mtb双抗原夹心ELISA法,它们均适用于Mtb血清学的临床辅助诊断.
作者：蒋纾芳；郭兰芹；宗克亮；杨锡琴；刘志强；赵照；修冰水；段翠密；陈堃
来源：生物技术通讯 2015 年 26卷 5期
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