利用粘附式细胞仪(ACAS-570)结合相应的荧光探针分别测定了外源性神经酰胺诱导NIH 3T3细胞凋亡时胞浆游离Ca2+水平和UVB照射NIH 3T3 细胞所致细胞内pH的变化以及神经酰胺的生成对这一变化的影响.结果表明:1.神经酰胺能够导致NIH 3T3细胞胞浆游离Ca2+升高;胞浆Ca2+升高既来源于胞外钙,又来源于胞内钙池,但外钙内流是引起和维持胞内Ca2+处于高水平的必要条件;NIH 3T3细胞钙池上存在着两种受体:IP3受体和Ryanodine受体,其中IP3受体较占优势.2.UVB照射导致NIH 3T3细胞凋亡时胞浆碱化并持续约2小时左右恢复正常,pH的变化参与了细胞凋亡的过程并受到神经酰胺生成的调控.这可能是UVB照射启动了磷脂肌醇通路激活磷脂酶C,导致神经酰胺的生成、Ca2+动员和蛋白激酶C的活化,从而激活Na+/H+对流引起胞浆碱化.所以,胞浆游离Ca2+的增加和pH的升高不是两个孤立的事件.
作者:丁振华;刘斐球;黄美贤;郑莉;周美娟
来源:生物物理学报 2000 年 16卷 2期