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探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,5-Aza-dC)对人急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞的增殖抑制作用及对RASSF10基因启动子甲基化状态的影响.体外培养Molt-4细胞,采用不同浓度5-Aza-dC对Molt-4细胞进行处理.采用MTF法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测RASSF10 mRNA表达的变化,Western blot检测RASSF10蛋白表达的变化,COBRA实验检测RASSF10甲基化水平.一定浓度的5-Aza-dC作用Molt-4细胞后,细胞增殖抑制率显著升高,且具有时间和剂量依赖性.对照组Molt-4细胞未检出RASSF10 mRNA及蛋白表达,而5-Aza-dC处理组检出RASSF10基因重新表达.COBRA实验结果提示对照组Molt-4细胞中存在启动子高甲基化的现象,而5-Aza-dC处理组Molt-4细胞的RASSF10基因被部分去甲基化.甲基化抑制剂5-Aza-dC可通过对RASSF10基因的去甲基化作用,重新恢复RASSF10的表达,从而抑制Molt-4细胞的增殖.

作者:汪茗;章尧;谢向荣;刘善浩;戚之琳;毕富勇

来源:生物学杂志 2013 年 30卷 1期

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作者:
汪茗;章尧;谢向荣;刘善浩;戚之琳;毕富勇
来源:
生物学杂志 2013 年 30卷 1期
标签:
去甲基化 白血病 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 RASSF10基因
探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,5-Aza-dC)对人急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞的增殖抑制作用及对RASSF10基因启动子甲基化状态的影响.体外培养Molt-4细胞,采用不同浓度5-Aza-dC对Molt-4细胞进行处理.采用MTF法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测RASSF10 mRNA表达的变化,Western blot检测RASSF10蛋白表达的变化,COBRA实验检测RASSF10甲基化水平.一定浓度的5-Aza-dC作用Molt-4细胞后,细胞增殖抑制率显著升高,且具有时间和剂量依赖性.对照组Molt-4细胞未检出RASSF10 mRNA及蛋白表达,而5-Aza-dC处理组检出RASSF10基因重新表达.COBRA实验结果提示对照组Molt-4细胞中存在启动子高甲基化的现象,而5-Aza-dC处理组Molt-4细胞的RASSF10基因被部分去甲基化.甲基化抑制剂5-Aza-dC可通过对RASSF10基因的去甲基化作用,重新恢复RASSF10的表达,从而抑制Molt-4细胞的增殖.

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